Набор FTP Display обеспечивает ферментативную фрагментацию двуцепочечной ДНК, при этом позволяет достаточно просто варьировать размер получаемых фрагментов в диапазоне 100 – 800 п.н. Суть метода заключается в использовании двух ферментативных реакций: создание разрезов (ников) в ДНК с помощью неспецифической ДНКазы I и дальнейшая полимеризация с вытеснением комплементарной цепи ДНК с помощью термостабильной SD ДНК-полимеразы. В результате генерируется ряд двуцепочечных фрагментов ДНК с перекрывающимися участками. Полученные фрагменты не требуют дополнительного восстановления концов (как в случае других методов фрагментации) и могут быть сразу использованы для присоединения служебных последовательностей (адаптеров, индексов).
Процедура фрагментации проводится в одной пробирке, что существенно сокращает время работы и обеспечивает высокий практический выход реакции. Высокое качество получаемых фрагментов ДНК гарантирует в дальнейшем создание качественных библиотек для массового параллельного секвенирования (NGS).
Преимущества набора FTP Display
- Небольшое количество исходного материала ДНК, нг – от 10;
- заменяет соникаторы и небулизаторы при пробоподготовке к NGS;
- простая и быстрая фрагментация в одной пробирке;
- большая чем при физической фрагментации сохранность структуры концов фрагментов;
- объединяет в одном этапе фрагментацию, восстановление концов ДНК и аденилирование.
Состав набора
|
Наименование реагента
|
Пробирка, шт.
|
Цвет крышки
пробирки
|
Номинальный объем, мкл
|
|
На 8 реакций
|
На 24 реакции
|
На 96 реакций
|
|
Реакционный буфер
|
1
|
|
Желтый
|
60
|
170
|
675
|
|
Смесь ферментов
|
1
|
|
Красный
|
80
|
240
|
960
|
|
Активатор
|
1
|
|
Черный
|
64
|
192
|
768
|
|
Вода для ПЦР
|
1
|
|
Белый
|
400
|
800
|
1400
|
Хранение компонентов набора: от - 18 до - 20 °С в течении 12 месяцев.
Транспортирование: при температуре не выше - 18 °С.