LumiMount DAPI — это готовая к использованию фиксирующая среда на водной основе, содержащая ядерный краситель DAPI (4’,6-диамидино-2-фенилиндол). Она предназначена для одновременного окрашивания клеточных ядер и герметизации флуоресцентно меченых цитологических или гистологических препаратов. DAPI избирательно связывается с AT-богатыми участками двухцепочечной ДНК, вызывая более чем 20-кратное усиление синей флуоресценции. Максимумы спектра: поглощение — 358 нм, эмиссия — 461 нм.
Характеристики среды
- Объём, мл — 15;
-
основа — водная;
-
содержит DAPI — да;
-
коэффициент преломления (жидкая фаза) — 1,38;
-
коэффициент преломления (после частичного высыхания) — до 1,46;
-
тип герметизации — полупостоянная;
-
условия хранения препарата после монтирования, °С — от +2 до +8;
-
совместимость — совместима с большинством стандартных флуорохромов;
-
дополнительно — рекомендуется герметизация краёв покровного стекла лаком.
В традиционных протоколах окрашивание ядер и монтирование выполняются раздельно, что увеличивает время подготовки образца и риск повреждения сигнала. Кроме того, без специальных стабилизирующих добавок флуорохромы быстро теряют яркость под микроскопом. Данная среда решает обе задачи за один шаг: обеспечивает чёткую визуализацию ядер и защищает весь флуоресцентный сигнал от фотобелинга благодаря встроенным антифейд-компонентам.
После нанесения среда постепенно концентрируется под покровным стеклом за счёт испарения воды, что приводит к увеличению коэффициента преломления до 1,46 — значения, близкого к оптическим характеристикам стекла. Это улучшает качество изображения при микроскопии. Герметизация считается полупостоянной: препараты можно хранить при +2…+8 °С в темноте в течение нескольких недель. При необходимости покровное стекло легко удаляется путём инкубации слайда в PBS-буфере до полного растворения среды.
Для максимальной долговечности образца рекомендуется дополнительно герметизировать края покровного стекла водонепроницаемым лаком — это предотвратит высыхание и проникновение влаги. Среда совместима с большинством распространённых флуоресцентных меток (FITC, TRITC, Cy3, Alexa Fluor и др.), что делает её универсальным решением для многоцветной микроскопии.
