Антибиотики, буферы, добавки, ферменты, факторы роста для культуральных сред

Агароза с низким EEO — полисахарид, используемый для разделения нуклеиновых кислот по размерам при электрофорезе в агарозном геле. Идеально подходит для расщепления фрагментов ДНК и РНК от 50 п.н. до >30 кб.

Особенности

• Идеально подходит для анализа и восстановления ДНК и РНК в обычных условиях;
• прочная гелевая структура обеспечивает лучшую управляемость и меньшую ломкость.

• рекомендуется использовать 0,5 буфера TBE (арт. G3002) или 1 буфер TAE (арт. G3001) для приготовления соответствующего количества гелевого препарата и буфера для электрофореза;
• в зависимости от количества геля и концентрации геля соответствующее количество порошка агарозы добавляют в стеклянную коническую колбу, содержащую определенное количество буфера для электрофореза (объем добавляемого буфера для электрофореза не должен превышать 50% емкости конической колбы).
• коническую колбу, накрытую сверху полиэтиленовой пленкой и помещают в микроволновую печь для нагревания и растворения агарозы.
• к агарозе следует добавить соответствующее количество красителей на основе нуклеиновых кислот, таких как нетоксичный краситель на основе нуклеиновых кислот SerRed (арт. G3606) или бромид этидия EB (арт. G3010), когда раствор остынет примерно до 50 °C его следует хорошо перемешать.
• раствор наливают в форму для заливки геля. Не касаясь дна формы помещают гребенки. Толщина геля обычно контролируется в пределах 3-5 мм.
• агарозный гель может затвердевать примерно за 30 минут при комнатной температуре (время затвердевания различных концентраций геля различно и подбирается в зависимости от реальной ситуации).

L-глутамин — важное питательное вещество в работе с клеточными культурами, так как обеспечивает энергию для культивируемых клеток и принимает участие в синтезе белка и метаболизме НК. Но так как L-глутамин из-за нестабильности в растворах может спонтанно разлагаться, это сильно влияет на результаты эксперимента.

L-аланил-L-глутамин, он же аланил-глутамин, аланин-глутамин может гидролизоваться пептидазой, высвобождаемой в среду во время культивирования клеток. Гидролизованные продукты L-аланил-L-глутамина — это L-аланил и L-глутамин, они способны поглощаться и использоваться клетками. Следовательно, L-аланил-L-глутамин может являться дипептидным заменителем L-глютамина, который легко растворим в водных растворах и обладает хорошей стабильностью водного раствора, который может быть полностью использован клетками. Этот продукт представляет собой добавку L-аланил-L-глютамина в концентрации 200 мМ, которая была строго протестирована на наличие микоплазмы и бактерий.

Условия хранения и транспортировки: при температуре 2-8 °C в защищенном от света месте в течение 24 месяцев.

Раствор в 100×-концентрации смеси антибиотиков и антимикотика в 0,9% физиологическом растворе для применения в культуральных работах.

Состав:

• пенициллина, ЕД/мл— 10 000;
• стрептомицина, мг/мл — 10;
• амфотерицин Б, мкг/мл — 25.

Сульфат G418 является селективным антибиотиком и вырабатывается бактерией Micromonospora rhodorangea. Ингибирует синтез белка как в прокариотических, так и в эукариотических клетках путем связывания рибосом. Его можно использовать для быстрого скрининга клеточных линий, экспрессирующих специфические гены устойчивости.

Рекомендуемая производителем концентрация для первоначального скрининга клеток млекопитающих, растительных клеток и дрожжей составляет 400 мкг/мл, 10 мкг/мл и 500 мкг/ мл соответственно. Концентрация G-418 может быть увеличена или уменьшена в соответствии с результатами эксперимента.

После растворения сульфат G418 может быть отфильтрован на 0,22 мкм для стерилизации и разделен на небольшие аликвоты, которые можно хранить в течение 12 месяцев при температуре 4 ℃ или заморозить при температуре -20 ℃ до истечения общего срока годности. Наиболее часто используемый раствор для хранения готовится на основе 100 мМ HEPES (pH7.3) в концентрации 50 мг/мл, преимуществом которого является то, что pH системы культивирования не будет изменен после добавления раствора для хранения.

Фосфатно-солевой буфер Дульбекко (DPBS) представляет собой сбалансированный раствор неорганических солей в очищенной воде, стерилизованный путем фильтрации через мембрану с порами размером 0,1 мкм. В отличие от обычного PBS, у DPBS сниженное содержание фосфатов, что может быть крайне важным в специфических экспериментах.

Не содержит ионы кальция и магния, что делает его особенно полезным в ситуациях, когда необходимо удалить или предотвратить влияние кальция и магния, например, при промывании клеток, обработанных хелаторами, или при использовании в качестве растворителя для реагентов, разведения и отмывки клеток, а также для хроматографических и других лабораторных целей. Не содержит феноловый красный, что позволяет избежать потенциального влияния этого индикатора на чувствительные аналитические процессы.

DPBS широко используется в работах с клеточными культурами, например, для промывания, транспортировки или разбавления клеток, для приготовления различных реагентов и в других лабораторных задачах.

Для питания клеточной культуры в DPBS можно добавить глюкозу и пируват натрия, что способствует поддержанию жизнеспособности клеток и активных биологических процессов.

Характеристики буфера

• KCl, мМ — 2,68;
• KH₂PO₄, мМ — 1,47;
• NaCl, мМ — 137;
• Na₂HPO₄*12H₂O, мМ — 8,0;
• pH при 25 °С — 7,2-7,8;
• без кальция и магния;​​
• без фенолового красного;
• стерильный, фильтрация мембраной 0,1 мкм.

Фосфатно-солевой буфер Дульбекко (DPBS) представляет собой сбалансированный раствор неорганических солей в очищенной воде, стерилизованный путем фильтрации через мембрану с порами размером 0,1 мкм. В отличие от обычного PBS, у DPBS сниженное содержание фосфатов, что может быть крайне важным в специфических экспериментах.

Содержит ионы кальция и магния, сущность которых заключается в поддержании естественной среды для клеточных культур. Не содержит феноловый красный, что позволяет избежать потенциального влияния этого индикатора на чувствительные аналитические процессы.

DPBS широко используется в работах с клеточными культурами, например, для промывания, транспортировки или разбавления клеток, для приготовления различных реагентов и в других лабораторных задачах.

Для питания клеточной культуры в DPBS можно добавить глюкозу и пируват натрия, что способствует поддержанию жизнеспособности клеток и активных биологических процессов.

Характеристики буфера

• KCl, мМ — 2,68;
• KH₂PO₄, мМ — 1,47;
• NaCl, мМ — 137;
• Na₂HPO₄*12H₂O, мМ — 8,0;
• CaCl₂ безводный, мМ — 0,9;
• MgCl₂*6H₂O, мМ — 0,49;
• pH при 25 °С — 7,2-7,8;
• без фенолового красного;
• стерильный, фильтрация мембраной 0,1 мкм.

Буфер загрузочный, белковый, PAGE, 5×, используется для электрофорного синтеза белковых гелей в естественных условиях с использованием трис-глициновых или трис-ацетатных гелей. Он имеет рН 8,6 и содержит бромфеноловый синий в качестве красителя для отслеживания.

Буфер загрузочный, не редуцированный, SDS-PAGE, 5×, содержащий буфер Tris-HCl (63 мМ, рН 6,8), глицерин (10%), SDS (2%) и бромфеноловый синий (0,0025%), используется для электрофоретической загрузки восстановленных белковых образцов SDS-PAGE.

Хранение при -20 ℃, срок годности 12 месяцев.

Буфер загрузочный, редуцированный, с бромфеноловым синим, 5× содержит буфер Tris-HCl (63 мм, рН 6,8), DTT (20 мм), глицерин (10%), SDS (2%) и бромфеноловый синий (0,0025%), используется для электрофоретической загрузки восстановленных белковых образцов SDS-PAGE.

Хранение при -20 ℃, срок годности 12 месяцев.

Буфер трис-солевой (TBS) с твин-20, 10× — это исходный раствор, который идеально подходит для приготовления промывочного буфера TBS-Tween (TBST) или блокирующего буферного разбавителя, используемого для таких применений, как ELISA, Вестерн-блоттинг и другие иммунологические анализы.

Этот концентрированный буфер можно использовать для регулирования рН с помощью концентрированной кислоты или основания. Просто разбавьте исходный раствор чистой водой и продолжайте эксперимент. Основными компонентами данного буфера является 100 мм Tris, 1,5 м NaCl, 1% Tween-20, pH 7,4-7,6, которые перед использованием необходимо разбавить в 10 раз.

PBS (физиологический раствор с фосфатным буфером) — это солевой раствор, который используется для различных применений в культуре клеток, таких как промывание клеток перед диссоциацией, при транспортировке клеток или ткани, клеточном разделении, при подсчете и приготовлении реагентов. В состав PBS не входят кальций и магний для смывания хелаторов из культуры перед диссоциацией клеток. PBS действует как буфер, помогая поддерживать рН среды для культивирования клеток. PBS имеет множество применений, поскольку он изотонический и нетоксичный для большинства клеток.

Характеристики

• Состав: 2,7 мм KCl, 2,0 мМ KH2PO4, 137 мм NaCl, 10 мм Na₂HPO₄, pH 7,2-7,5 при 25 °С;
• без кальция, магния, фенольного красного;
• срок годности: 24 месяца с даты изготовления.

Фосфатно-солевой буфер — изотонический раствор, широко используемый в биологии для различных применений. Буфер имеет близкие к физиологическим значения pH, осмолярности и концентрацию ионов, не токсичен к клеткам и поэтому применяется для промывки клеток, а также транспортировки тканей, разведении концентрированных растворов и сухих веществ.

Характеристики фосфатно-солевого буфера

• 500 табл. для приготовления 50 л раствора 0,01 М фосфатно-солевого буфера;
• состав: NaCl (0,137 моль/л), КCl (0,0027 моль/л);
• расход — 1 таблетка на 100 мл воды;
• pH готового буфера 7,2-7,6;
• срок годности — 3 года.