Применение проточной цитометрии для анализа жизнеспособности бактериальных клеток

Проточная цитометрия — это мощный инструмент, который позволяет анализировать физические и химические свойства клеток в режиме реального времени. Этот метод особенно полезен для изучения бактериальных популяций, так как он обеспечивает высокую чувствительность, точность и возможность работы с большим количеством клеток. Основное преимущество проточной цитометрии заключается в том, что она позволяет одновременно оценивать несколько параметров клеток, таких как размер, структура, мембранный потенциал, активность ферментов и жизнеспособность.

Преимущества проточной цитометрии

• Высокая пропускная способность: за короткое время можно проанализировать десятки тысяч клеток;
• многопараметрический анализ: возможность одновременной оценки нескольких характеристик клеток (например, размера, формы, мембранного потенциала и метаболической активности);
• чувствительность: метод позволяет обнаруживать даже небольшие изменения в состоянии клеток;
• специфичность: использование специфических красителей позволяет точно идентифицировать живые и мертвые клетки.

Примеры применения анализа жизнеспособности бактерий методом проточной цитометрии

• Оценка эффективности антибиотиков и анализ влияния антибактериальных препаратов на популяцию бактерий;
• исследование стрессовых условий и изучение воздействия факторов окружающей среды (температура, pH, осмотическое давление) на бактерии;
• контроль качества пищевых продуктов и определение наличия живых патогенных бактерий в продуктах питания;
• экологические исследования и оценка состояния бактериальных сообществ в почве, воде и других средах.

Жизнеспособность бактерий: основные понятия

Жизнеспособность бактериальных клеток определяется их способностью поддерживать метаболическую активность, сохранять целостность мембраны и выполнять другие функции, необходимые для выживания. Проточная цитометрия позволяет различать живые, мертвые и поврежденные клетки на основе различных маркеров, таких как:

• целостность мембраны: живые клетки имеют неповрежденную мембрану, которая может быть исследована с помощью красителей, проникающих только в поврежденные клетки;
• метаболическая активность: оценка активности внутриклеточных ферментов или продукции АТФ;
• морфологические изменения: размер и форма клеток могут изменяться при стрессовых условиях или гибели.

Основные методы окрашивания бактерий для анализа жизнеспособности

Для анализа жизнеспособности бактерий с использованием проточной цитометрии применяются различные флуоресцентные красители, которые позволяют дифференцировать живые и мертвые клетки.

Красители для оценки целостности мембраны

• Пропидий йодид (PI): этот краситель не проникает через неповрежденные мембраны живых клеток, но связывается с ДНК мертвых клеток, окрашивая их в красный цвет. PI широко используется для идентификации мертвых клеток.
• SYTOX Green/Red: эти красители также проникают только в клетки с нарушенной мембраной, что делает их полезными для анализа мертвых клеток.

Красители для оценки метаболической активности

• Carboxyfluorescein Diacetate: этот краситель проникает в живые клетки, где ферментативно гидролизуется до флуоресцирующего соединения. Это позволяет оценить метаболическую активность клеток.
• Резазурин (он же Alamar Blue): краситель, который восстанавливается метаболически активными клетками до флуоресцентного продукта (ресоруфина). Это широко используемый метод для оценки жизнеспособности.

Комбинированные подходы

Для более точного анализа жизнеспособности часто используют комбинацию красителей. Например:

• SYTO 9 (или LUCS 13) + Пропидий йодид (PI). Эта комбинация реализована в коммерческом наборе BacLight: SYTO 9 окрашивает все клетки (как живые, так и мертвые), а PI окрашивает только мертвые клетки. Комбинация этих красителей позволяет четко разделить живые и мертвые клетки.

Компания Диаэм предлагает проточные цитофлуориметы 7S (1 лазер, до 5 флуоресцентных каналов), производства, BioSino, Китай с автосемплером, которые имеют большой потенциал для проведения рутинных исследований бактериальных культур.

Не смотря на, то, что прибор оснащен всего одним лазером, тем не менее он имеет 5 каналов детекции, в том числе по каналам PI и FITC, которые используются для работы с бактериями.

Узнать больше и приборе, а также записаться на апробацию прибора в лаборатории Диаэм Вы можете, заполнив форму.

Пока нет данных. Перейти в каталог

Развернуть все Названия полностью

Цена в валюте производителя / в рублях

BioSino, Китай Проточный цитофлуориметр, 1 лазер, до 5 флуоресцентных каналов, 7S, (аналог арт. 0500-3115, Luminex; арт. A31266_comp, Thermo FS)

ZS-AE7S

5 366 108, руб. 395 900 CNY

Простой, удобный в работе проточный цитофлуориметр 7S, от китайской компании BioSino, способен обеспечить до 95% потребностей клеточной лаборатории в области клеточного анализа. Прибор имеет один синий лазер (488 нм), но, несмотря на это, обеспечивает до 7 каналов флуоресцентной детекции и обладает высокой чувствительностью детекции и простым ПО, что делает получение результатов быстрым и максимально комфортным. 7S позволяет реализовать все базовые методы цитометрии в лаборатории: анализ клеточного апоптоза и аутофагии, оценка эффективности трансфекции и уровня экспрессии, изучить фенотипы и субпопуляции лимфоцитов, провести HLA-типирование или анализ индекса фрагментации ДНК спермы человека, а также изучить плоидность растений. Цитофлуориметр 7S оснащен синим аргоновым лазером 488 нм (50 мВт) и системой детекции из 7 сверхчувствительных светодиодных детекторов, которые регистрируют 5 флуоресцентных сигналов, а также прямое (FSC*) и боковое светорассеяния (SSC**). Система детекции позволяет работать как с самыми популярными красителями (FITC, Alexa 488, PE, PI), так и тандемными красителями (PE-Texas Red, PE-Cy5, PE-Cy5.5, PE-Cy7), что позволяет реализовать простые мультиплексные эксперименты. Демонстрация прибора Прибор имеется на складе, есть возможность запросить демонстрацию на рабочем месте заказчика. Форма заказа доступна по кнопке «Заказать демо». Технические характеристики цитофлуориметра 7S Автоматический забор проб с функцией автоматического промешивания; ПО на английском языке; сбор данных / компенсация флуоресценции в 1 клик; метод определения концентрации клеток – прямой подсчет; источник возбуждения – синий лазер 488 нм; каналы детекции: FL1 – 525/50 нм (FITC/Alexa 488); FL2 – 585/40 нм (PE); FL3 – 630/30 нм (PE-Texas Red/ECD/PI); FL4 – 697/60 нм (PerCP /PE-Cy5 / PE-Cy5.5); FL5 – 780/60 нм (PE-Cy7); FSC* чувствительность, мкм – менее 1; минимальный объем образца, мкл – 90; чувствительность, MESF*** – не более 150 (по FITC) и не более 50 (по PE); коэффициенты вариации (CV) для всех каналов, % – менее 2; размер клеток/частиц, мкм – от 0,5 до 50; габариты, Ш × Г × В, см — 500 х 605 х 305; вес, кг – 35. ------------------------------- * FSC (Forward Scatter) – прямое светорассеивание. ** SSC (Side Scatter) – боковое светорассеивание. ***MESF (Molecules of Equivalent Soluble Fluorochrome) – число молекул указанного эквивалентного растворимого флуорохрома. См. также: Проточный цитофлуориметр, до 5 лазеров, до 27 флуоресцентных каналов, ZE5, Bio-Rad Сортер клеток, до 3 лазеров, до 4 флуоресцентных параметров, S3e, Bio-Rad Антитела Центрифуги Диссоциатор клеточный DSC-400, RWD, Китай

BioSino, Китай Загрузчик 96-луночных планшетов для проточного цитофлуориметра SinoCyte, автоматический

SinoCyte-S-01/96L

1 015 210, руб. 74 900 CNY

Высокоэффективные автоматические загрузчики планшетов для проточного цитофлуориметра SinoCyte оснащены функцией ротационного перемешивания 96-луночных планшетов с плоским и круглым дном.

Thermo FS Набор для определения концентрации и жизнеспособности бактерий LIVE/DEAD BacLight

L34856

100 реакций

243 408, руб. 243 408, руб. RUB

Набор для определения концентрации и жизнеспособности бактерий: для проточной цитометрии (лазер 488 нм); состав — SYTO 9, йодид пропидия (PI); калибровочные микросферы (6 мкм) для определения концентрации; принцип действия: SYTO 9 (зеленый) окрашивает все клетки, PI (оранжево-красный) окрашивает клетки с поврежденной мембраной.

CDH, Индия Резазурин натриевая соль, протестирована на растительной ткани, CAS 62758-13-8

TC1235 .5 gm

5 г

хранение +2...+8°C

New

12 930, руб. 134,= USD

Синоним: аламаровый синий. CAS-No. 62758-13-8 Химическая формула C₁₂H₆NNaO₄ Молекулярный вес 251,17 Внешний вид Порошок темно красного или темно зеленого цвета Растворимость 20 ppm в метаноле до прозрачного раствора Видимый рН переход pH 3,8 (оранжевый) - pH 6,5 (фиолетовый) Потеря при высушивании (при 105 °C, 2 часа) <= 10,00%

См. также:

Ниже вы можете задать вопрос или оставить запрос в свободной форме: